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L'alcol freddo viene utilizzato per separare il DNA dalle soluzioni a base d'acqua, consentendone la purificazione per successivi test genetici. Aggiungere alcol ad una soluzione contenente DNA è un modo semplice per renderlo puro a temperature più basse e rallentare gli enzimi che lo degradano, dando migliori risultati di estrazione.
Rottura pareti cellulari
Le procedure di estrazione per ottenere il DNA puro devono eliminare tutte le componenti molecolari e chimiche del tessuto da cui viene estratto il DNA. I primi passi riguardano la distruzione delle pareti cellulari. Questo può essere fatto con vari agenti chimici che sono caustici delle membrane cellulari ma non danneggiano il DNA. Le cellule possono anche essere sonicate, omogeneizzate o macinate per distruggere le membrane.
Rimozione dei lipidi
Una volta distrutte le pareti cellulari, viene aggiunto un detergente per eliminare i grassi e gli oli che costituiscono le membrane cellulari. I detersivi causano la dissoluzione di oli e grassi in soluzione.
Rimuovendo le proteine
Proteine ed enzimi possono essere digeriti aggiungendo una proteasi alla soluzione. Le proteasi distruggono le proteine in piccoli peptidi e amminoacidi.
DNA precipitante
L'aggiunta di alcool ghiacciato ad una soluzione farà precipitare e aggregare il DNA. Il materiale genetico può essere raccolto centrifugando il campione e decantando lo strato liquido. Dovrebbe esistere come un piccolo sedimento sul fondo della provetta da centrifuga.
DNA purificante
Il DNA può essere lavato sospendendo nuovamente in una soluzione alcolica fredda e ri-centrifugato più volte per ottenere un campione molto puro. Alcol tipici usati includono etanolo e isopropanolo. Questo processo lascia un campione molto puro in test rigorosi.
